環(huán)孢素A（新山地明）是目前公認(rèn)的抑制移植排斥反應(yīng)最為有效的藥物之一，自20世紀(jì)70年代應(yīng)用于臨床以來(lái)，作為免疫抑制劑發(fā)揮了極其重要的作用。正常生理妊娠類似于同種異體移植，胚胎作為自然的同種移植物不受母體免疫排斥是免疫排斥現(xiàn)象的唯一例外，實(shí)際上反映母體對(duì)胚胎的免疫耐受。而妊娠失敗多因母體對(duì)胚胎的免疫排斥所致。

　　環(huán)孢素A研究通過(guò)原代培養(yǎng)早孕期人細(xì)胞滋養(yǎng)細(xì)胞及JAR滋養(yǎng)細(xì)胞株，在CsA作用下，研究環(huán)孢素A對(duì)早孕期人細(xì)胞滋養(yǎng)細(xì)胞titin表達(dá)的調(diào)控作用，為妊娠疾患的治療提供線索。

環(huán)孢素A（新山地明）對(duì)早孕期人細(xì)胞滋養(yǎng)細(xì)胞titin表達(dá)的調(diào)控作用

　　目的 探討CsA對(duì)早孕期人細(xì)胞滋養(yǎng)細(xì)胞titin表達(dá)的調(diào)控作用

　　方法 Western blot觀察pERK1/2的表達(dá)；ELISA分析MAP激酶活性；RT-PCR、Western blot檢測(cè)MEK特異性抑制劑U0126預(yù)處理或不預(yù)處理后CsA對(duì)細(xì)胞滋養(yǎng)細(xì)胞titin mRNA的轉(zhuǎn)錄及蛋白表達(dá)的影響。

　　結(jié)果

　　（1）CsA以時(shí)間和濃度依賴方式活化早孕期人細(xì)胞滋養(yǎng)細(xì)胞MEK激酶、促進(jìn)ERK1/2磷酸化，U0126預(yù)處理則抑制其基礎(chǔ)和CsA誘導(dǎo)的MAPK激酶活化和ERK1/2磷酸化。

　　（2）CsA以時(shí)間和濃度依賴方式誘導(dǎo)早孕期人細(xì)胞滋養(yǎng)細(xì)胞titin mRNA的轉(zhuǎn)錄，1.0μmol/LCsA處理72h可誘導(dǎo)titin蛋白的表達(dá)。

　　（3）U0126呈劑量依賴性地抑制CsA誘導(dǎo)的早孕期人細(xì)胞滋養(yǎng)細(xì)胞titin mRNA的轉(zhuǎn)錄。

　　（4）相關(guān)性分析顯示CsA對(duì)滋養(yǎng)細(xì)胞生物學(xué)功能調(diào)控與其誘導(dǎo)滋養(yǎng)細(xì)胞titin表達(dá)有關(guān)。

　　結(jié)論

　　（1）CsA呈時(shí)間劑量依賴方式活化MAPK/ERK1/2信號(hào)通路，促進(jìn)早孕期人細(xì)胞滋養(yǎng)細(xì)胞titin的表達(dá)。

　　（2）CsA通過(guò)誘導(dǎo)滋養(yǎng)細(xì)胞表達(dá)titin參與調(diào)控其生物學(xué)功能。

　　通過(guò)環(huán)孢素A的系列實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明：

　　（1）胰蛋白酶/DNase Ⅰ分步消化，Percoll密度梯度離心法分離純化滋養(yǎng)層細(xì)胞，方法簡(jiǎn)便可靠。CD133-2/AC141是鑒定細(xì)胞滋養(yǎng)層細(xì)胞的可靠分子。

　　（2）CsA一方面活化MAPK/ERK1/2信號(hào)通路促進(jìn)人細(xì)胞滋養(yǎng)細(xì)胞增殖、遷移能力與侵襲性、抑制其凋亡，；另一方面抑制Ca2+/Calcineurin/NFAT信號(hào)通路促進(jìn)人滋養(yǎng)細(xì)胞遷移能力和侵襲性。

　　（3）CsA通過(guò)MAPK/ERK1/2信號(hào)通路活化轉(zhuǎn)錄因子AP-1、NF-κB，調(diào)控滋養(yǎng)細(xì)胞的體外生物學(xué)行為。

　　（4）CsA通過(guò)活化MAPK/ERK1/2信號(hào)通路誘導(dǎo)滋養(yǎng)細(xì)胞titin表達(dá)。

　　（5）CsA誘導(dǎo)滋養(yǎng)細(xì)胞表達(dá)titin調(diào)節(jié)滋養(yǎng)細(xì)胞生物學(xué)行為。

　　為CsA可能成為防治反復(fù)自然流產(chǎn)、妊娠高血壓綜合征等妊娠并發(fā)癥的潛在藥物提供了理論依據(jù)及有用線索。

參考文獻(xiàn)：

①杜美蓉，《環(huán)孢素A對(duì)滋養(yǎng)細(xì)胞生物學(xué)功能及其信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)的調(diào)節(jié)作用》。復(fù)旦大學(xué)，2005.

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