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神經(jīng)節(jié)苷脂GM1對(duì)面神經(jīng)再生的影響

來(lái)源： 百濟(jì)新特藥房網(wǎng) 發(fā)布時(shí)間：2010-4-2 3:21:00
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摘要：目的：研究局部應(yīng)用神經(jīng)節(jié)苷脂GM-對(duì)兔面神經(jīng)損傷的修復(fù)作用。方法：將18只兔子隨機(jī)分為實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組。建立兔面神經(jīng)損傷后再生的實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ�，外源性給予GM1，分別于術(shù)后2周、4周、8周觀察面神經(jīng)的傳導(dǎo)速度及組織學(xué)變化。結(jié)果：術(shù)后2周、4周，實(shí)驗(yàn)組神經(jīng)傳導(dǎo)速度、有髓神經(jīng)纖維數(shù)均優(yōu)于對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。術(shù)后8周，實(shí)驗(yàn)組神經(jīng)傳導(dǎo)速度、有髓神經(jīng)纖維數(shù)與對(duì)照組差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義 結(jié)論：兔面神經(jīng)橫斷傷后立即應(yīng)用神經(jīng)節(jié)苷脂GM1對(duì)面神經(jīng)損傷后早期（2周、4周）再生恢復(fù)有明顯的促進(jìn)作用。
 
關(guān)鍵詞：神經(jīng)節(jié)苷脂；面神經(jīng)；神經(jīng)再生
 
    臨床上由面部外傷、腮腺腫物切除等原因造成的面神經(jīng)損傷很常見(jiàn)。面神經(jīng)損傷可嚴(yán)重影響患者的生存質(zhì)量。神經(jīng)損傷后的修復(fù)再生研究主要集中在兩大方面：一是神經(jīng)形態(tài)解剖學(xué)重建，二是神經(jīng)生物學(xué)特性的開(kāi)發(fā)。由于顯微外科技術(shù)的介入和發(fā)展，神經(jīng)手術(shù)的精確性大為提高，術(shù)后神經(jīng)恢復(fù)也有了明顯的改善。近年來(lái)，已從改進(jìn)顯微外科技術(shù)方面的探索轉(zhuǎn)向?qū)ι窠?jīng)再生過(guò)程中的細(xì)胞和分子改變的研究。有研究表明，神經(jīng)節(jié)苷脂GM1與周?chē)窠?jīng)再生密切相關(guān)。 
  
    本研究建立了兔面神經(jīng)損傷再修復(fù)的動(dòng)物實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ停庠葱越o予GM1，觀察面神經(jīng)修復(fù)再生的組織學(xué)及神經(jīng)傳導(dǎo)速度改變，旨為臨床早期應(yīng)用GM1促進(jìn)面神經(jīng)損傷再生提供理論和實(shí)驗(yàn)依據(jù)。
 
l 材料與方法 
 
    1.1 實(shí)驗(yàn)對(duì)象與分組 健康成年新西蘭白兔18只（新疆醫(yī)科大學(xué)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中心提供），雌雄不限，體重2.5～3.0 kg。隨機(jī)分為實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組，實(shí)驗(yàn)組注射神經(jīng)節(jié)苷脂GM1，對(duì)照組注射生理鹽水，隨后將實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組分別按術(shù)后2周、4周、8周又隨機(jī)分為3組，每組3只。實(shí)驗(yàn)期間，動(dòng)物給予基礎(chǔ)飼料、自來(lái)水及自然光。 
  
    1.2 實(shí)驗(yàn)方法 將新西蘭大白兔用0.05%硫噴妥鈉（1 ml/kg）腹腔注射麻醉，待麻醉平穩(wěn)后固定四肢，剔除耳根下毛發(fā)，碘酒、酒精消毒后鋪巾。在兔耳根下方做弧形切口，切開(kāi)皮膚、皮下組織。在16倍的顯微鏡下，利用顯微外科器械游離面神經(jīng)上頰支后將上頰支離斷，立即將神經(jīng)斷端行神經(jīng)外膜吻合（全部手術(shù)均由一人操作，在手術(shù)顯微鏡下完成）。實(shí)驗(yàn)組于吻合處用微量進(jìn)樣器注入2.0 μl GM1溶液，對(duì)照組用相同的方法注入2.0 μl生理鹽水，然后關(guān)閉創(chuàng)口。 
   
    1.3 檢測(cè)方法 各組動(dòng)物分別于術(shù)后2周、4周、8周處死，切取吻合神經(jīng)之近遠(yuǎn)心側(cè)約2 cm 神經(jīng)組織，放入10%福爾馬林液中固定，立即行神經(jīng)傳導(dǎo)速度檢測(cè)。檢測(cè)后標(biāo)本石蠟包埋，連續(xù)切片，行HE染色，光鏡下觀察實(shí)驗(yàn)組與對(duì)照組術(shù)后2周、4周、8周面神經(jīng)的組織學(xué)改變。
 
2 結(jié)果 
  
    2.1 神經(jīng)傳導(dǎo)速度測(cè)定 術(shù)后2周、4周，實(shí)驗(yàn)組神經(jīng)傳導(dǎo)速度比對(duì)照組快，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。術(shù)后8周，雖然實(shí)驗(yàn)組神經(jīng)傳導(dǎo)速度快于對(duì)照組，但差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），見(jiàn)表1。


    2.2 光鏡觀察結(jié)果 術(shù)后2周的組織病理學(xué)觀察結(jié)果表明，實(shí)驗(yàn)組神經(jīng)再生狀況優(yōu)于對(duì)照組，表現(xiàn)為吻合口處再生有髓神經(jīng)纖維通過(guò)，數(shù)量較對(duì)照組多，核也增大，但排列不齊，結(jié)締組織較多。術(shù)后4周，實(shí)驗(yàn)組神經(jīng)再生狀況優(yōu)于對(duì)照組，表現(xiàn)為通過(guò)吻合口處再生有髓神經(jīng)纖維數(shù)量增多，核大，外膜及束膜均增厚。術(shù)后8周，實(shí)驗(yàn)組與對(duì)照組差異不顯著，表現(xiàn)為有髓神經(jīng)排列整齊，核進(jìn)一步增大，外膜變薄、平滑，微血管通過(guò)吻合口。
 
3 討論 
    神經(jīng)節(jié)苷脂為含有唾液酸的酸性鞘糖脂，它由親水的寡糖鏈和親脂的神經(jīng)酰胺兩部分組成，故神經(jīng)節(jié)苷脂也可以看作是神經(jīng)酰胺的衍生物。神經(jīng)酰胺構(gòu)成疏水性的“尾”，插入膜脂質(zhì)雙層中，作為膜組成的一部分。親水的寡糖鏈（包括唾液酸）則連在神經(jīng)酰胺中的絲氨酸上，并與絲氨酸一起構(gòu)成極性“頭”，伸展在細(xì)胞表面的外環(huán)境中，有助于最大程度上維持細(xì)胞表面負(fù)電荷。這種物理上的不對(duì)稱性及化學(xué)結(jié)構(gòu)使得神經(jīng)節(jié)苷脂類物質(zhì)與細(xì)胞外各種信息
相互作用，并能導(dǎo)致部分細(xì)胞膜結(jié)構(gòu)的改變。
  
    GM1是一種主要的神經(jīng)節(jié)苷脂，其生物學(xué)功能主要集中在親神經(jīng)性和神經(jīng)再生兩方面。GM1富含于神經(jīng)細(xì)胞膜上，外源性GM1能被神經(jīng)細(xì)胞攝取，對(duì)維持神經(jīng)細(xì)胞膜正常功能及其穩(wěn)定性起重要作用。它能激活酪氨酸激酶受體、Na+-K+-ATP酶，參與突觸的發(fā)生過(guò)程，調(diào)節(jié)細(xì)胞內(nèi)Ca 平衡，減少活性氧的產(chǎn)生使神經(jīng)細(xì)胞在缺氧條件下的存活率提高，并能促使神經(jīng)細(xì)胞軸突、樹(shù)突發(fā)芽和再生。
   
    近年研究認(rèn)為，GM1對(duì)神經(jīng)再生有促進(jìn)作用。張繼東等研究結(jié)果表明，兔面神經(jīng)擠壓傷后立即應(yīng)用GM1對(duì)面神經(jīng)損傷后早期（2周、4周）再生恢復(fù)有明顯的促進(jìn)作用。張引成等研究神經(jīng)生長(zhǎng)因子（NGF）、GM1及NGF和GM1混合液對(duì)損傷面神經(jīng)的作用，探討GM1介導(dǎo)NGF對(duì)運(yùn)動(dòng)神經(jīng)元再生作用的影響，結(jié)果提示NGF能夠促進(jìn)運(yùn)動(dòng)神經(jīng)元再生，但這種能力有限；GM1能夠介導(dǎo)NGF促進(jìn)運(yùn)動(dòng)神經(jīng)元再生，表現(xiàn)出良好的生物學(xué)效應(yīng)，表明GM1對(duì)NGF促進(jìn)神經(jīng)再生的作用至關(guān)重要。
  
    何仲義等觀察GM1對(duì)異種神經(jīng)移植后神經(jīng)纖維再生和修復(fù)的效果，GM1組（20只）移植前將脛神經(jīng)浸泡于0.1%GM1液中10 min；對(duì)照組（10只）未經(jīng)任何處理，將兔脛神經(jīng)移植于兩組大鼠坐骨神經(jīng)，術(shù)后第2、4、6、8、10周，將辣根過(guò)氧化物酶（HRP）注入大鼠坐骨神經(jīng)吻合部遠(yuǎn)側(cè)端，結(jié)果GM1組術(shù)后第2周和第4周起，分別在同側(cè)L4-5脊神經(jīng)節(jié)和腰段脊髓前角見(jiàn)到HRP標(biāo)記細(xì)胞，而對(duì)照組從第4周和第6周起，在同側(cè)L4-5脊神經(jīng)節(jié)和腰段脊髓前角見(jiàn)到標(biāo)記細(xì)胞，術(shù)后GM1組標(biāo)記細(xì)胞數(shù)均明顯多于對(duì)照組（P＜0.01），標(biāo)記細(xì)胞數(shù)量隨神經(jīng)移植后存活期的延長(zhǎng)而增加。
  
    術(shù)后10周GM1組有髓纖維再生率明顯高于對(duì)照組（P＜0.01）。表明GM1可明顯促進(jìn)移植后神經(jīng)纖維的再生和修復(fù)。王明生等通過(guò)實(shí)驗(yàn)顯示，局部應(yīng)用GM1可使損傷后12 d再生有髓神經(jīng)纖維直徑增粗，說(shuō)明在再生的早期，神經(jīng)節(jié)苷脂GM1可促進(jìn)軸突發(fā)芽，后期促進(jìn)神經(jīng)纖維發(fā)育成熟。 
  
    本實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，術(shù)后2周和4周實(shí)驗(yàn)組的有髓神經(jīng)纖維數(shù)量及神經(jīng)傳導(dǎo)速度均優(yōu)于對(duì)照組，證實(shí)了神經(jīng)節(jié)苷脂GM1對(duì)兔面神經(jīng)再生有促進(jìn)作用。 
   
    總之，外源性神經(jīng)節(jié)苷脂GM1對(duì)兔面神經(jīng)損傷后再生早期有促進(jìn)作用。關(guān)于神經(jīng)節(jié)苷脂GM1促進(jìn)兔面神經(jīng)再生的作用機(jī)制及臨床用于面神經(jīng)損傷后再生的最佳劑量等，有待于進(jìn)一步研究探討。
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TAG： 神經(jīng)節(jié)苷脂 GM1 神經(jīng)再生 神經(jīng)損傷

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